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此文章轉載自：百代生物

地高辛標記是目前公認的最靈敏的DNA和RNA探針非放射性標記技術，適用于Southern雜交、Northern雜交、原位雜交、染色體雜交、斑點雜交和文庫篩選等幾乎所有的分子雜交場景，應用非常廣泛。

目前，使用較廣的地高辛標記試劑是Roche公司的隨機引物標記試劑盒（Dig DNA Labeling and Detection Kit）和地高辛RNA標記試劑盒（Dig RNA Labeling Kit）。

這二種試劑盒都具有非常優(yōu)異的探針標記性能，但缺點也非常明顯，那就是價格昂貴，以至于很多研究者都望而卻步。并且，在有些時候，國內(nèi)貨源緊張，到貨時間較長，對研究進展影響很大。

百代生物海歸團隊經(jīng)長期研發(fā)，研發(fā)成功了可高效進行地高辛標記的試劑盒----BIOG地高辛標記試劑盒。

試劑盒采用熱啟動PCR技術，對DNA和cDNA模板進行地高辛標記，與隨機引物法和RNA探針相比，具有非常顯著的性能優(yōu)勢。其一，PCR是目前公認的效率高的DNA體外擴增技術之一，BIOG地高辛標記試劑盒采用PCR技術進行探針制備，只需非常微量的模板，就能制備出大量的高活性的地高辛標記探針。

取5ng Hela細胞基因組DNA為模板，使用BIOG地高辛標記試劑盒標記GAPDH，就可以制備出高達1ug較純的均質化的GAPDH探針。

其二，BIOG地高辛標記試劑盒使用了我公司基因工程優(yōu)化的超級熱啟動Taq酶，

該酶經(jīng)嚴格的化學封閉，在室溫下完全沒有活性，可最大程度地減少因引物模板錯配以及引物二聚體形成等導致的非特異性標記，探針標記特異性高。

其三，試劑盒配置的超級熱啟動Taq酶在合成DNA鏈的過程中，較普通Taq酶能夠更加高效地摻入地高辛標記的核苷酸，而試劑盒配置的Dig Labelling經(jīng)反復實驗優(yōu)化，Dig-dUTP與未標記核苷酸也處于最佳搭配比例，Dig-dUTP能夠大程度地摻入PCR產(chǎn)物，這使得BIOG地高辛標記試劑盒的地高辛標記效率顯著優(yōu)于部分同類產(chǎn)品。

以BIOG地高辛標記試劑盒和同類試劑盒X分別標記5ng Hela細胞DNA，5倍稀釋PCR產(chǎn)物，點樣于尼龍膜，再以NBT/BCIP進行檢測，X公司PCR標記試劑盒制備的探針，0.5pg點樣斑點可被有效檢測，而BIOG地高辛標記試劑盒制備的探針，點樣量低至0.1pg，仍可被有效地檢測出來，這說明，同樣量的標記探針，BIOG地高辛標記試劑盒制備的探針中地高辛摻入量顯著優(yōu)于X公司。以上可見，BIOG地高辛標記試劑盒具有非常優(yōu)異的探針標記和制備性能。

然而，該試劑盒的定價卻并不高，10T的試劑盒定價只有1600多元，遠遠低于國外同類產(chǎn)品。

由于其出色的性價比，BIOG地高辛標記試劑盒廣受研究者的歡迎，目前已經(jīng)成為200多所大學和科研單位進行分子雜交的有力工具。