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此文章轉(zhuǎn)載自:莫納生物Monad

MicroRNA (miRNA) 是一類長度約為 20-24 個核苷酸，進化上高度保守的小分子非編碼 RNA，主要參與基因轉(zhuǎn)錄后水平的調(diào)控。首個 microRNA 發(fā)現(xiàn)于 1993 年，Victor Ambros 和 Gary Ruvkun 分別領(lǐng)導的兩個實驗室在線蟲中發(fā)現(xiàn)了一種名為 lin-4 的基因, 這種基因并不編碼蛋白，而是表達一種長度為 22nt 的小 RNA，可以抑制一種核蛋白 LIN-14 基因的表達從而調(diào)節(jié)線蟲的發(fā)育。這種小 RNA 在 2001 年被命名為 microRNA（微小核糖核酸），簡稱 miRNA。此后 miRNA 的研究取得了很大進展，發(fā)表文獻也從 2001 年的 5 篇增加到了 2017 年的 13179 篇，增加了 2000 多倍。成千上萬的 miRNA 在各種物種中被發(fā)現(xiàn)，開辟了一片全新而廣闊的科學研究領(lǐng)域。

目前，miRNA 研究方法已經(jīng)比較成熟：通過深度測序，尋找研究組和對照組的差異表達的 miRNA，再以實時熒光定量 PCR 加以驗證。運用生物信息學分析尋找 miRNA  可能的靶點以及靶序列，可能涉及的信號通路，之后進一步通過抑制目標 miRNA 或過表達觀察一些表型或基因表達變化；用熒光素酶報告基因?qū)嶒灐ull-down 實驗等來驗證miRNA 與靶基因 mRNA 的直接結(jié)合，以探討發(fā)現(xiàn) miRNA 的作用機制。目前已經(jīng)證明，miRNA 的表達水平與多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有著密切的關(guān)系；miRNA 表達水平的監(jiān)測在疾病的早期診斷和預后觀察等方面具有十分重要的意義。

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■ 極強特異性

使用升級版化學修飾的熱啟動聚合酶，能有效抑制非特異性擴增及引物二聚體產(chǎn)生

■ 更好的單堿基分辨能力

能夠較大限度區(qū)分家族miRNA不同成員間單個堿基的差異，定量更準確

■ 靈敏度高

更適合miRNA定量的Buffer配方，靈敏度高，線性范圍寬廣 

■ 靈敏度高全平臺適用，無需單獨添加Rox

  

可完美兼容None/Low/High Rox模式的不同機型

｜性能展示｜

01

優(yōu)秀的單堿基分辨能力

選取序列高度同源的 let-7a 家族為靶標 miRNA，使用 MonAmp? miRNA Universal Super Specificity qPCR Mix、市場常見 V 品牌及 T 品牌 MiRNA定量產(chǎn)品進行單堿基區(qū)分能力的測試，結(jié)果顯示 MonAmp? miRNA Universal Super Specificity qPCR Mix 具有更強的單堿基分辨能力，能較大限度區(qū)分家族 microRNA 不同成員間單個堿基的差異。

02

寬廣的線性動態(tài)范圍

以體外合成的 miRNA miR-Pic 為模板，使用 MonScript? miRNA First Strand cDNA Synthesis Kit (Tailing Reaction) 進行逆轉(zhuǎn)錄，將合成的 cDNA 梯度稀釋線性擴增，結(jié)果顯示 MonAmp? miRNA Universal Super Specificity qPCR Mix 擴增效率高，可檢測低至 ag 級的 miRNA 表達。

03

全平臺適用，無需單獨添加Rox

MonAmp? miRNA Universal Super Specificity qPCR Mix可完美兼容不同機型（None/Low/High Rox 模式），表現(xiàn)出良好的通用性。

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