Color-coded Prestained Protein Marker, High Range (43-315 kDa) 是一種能共價(jià)結(jié)合藍(lán)色、綠色、橙色或粉色染料的純化蛋白混合物,經(jīng)電泳后會(huì)分解為介于 43 和 315 kDa 之間的 8 種條帶。蛋白濃度已經(jīng)精心平衡,以獲得均勻的強(qiáng)度。相對(duì)于未結(jié)合的蛋白,染料與蛋白的共價(jià)結(jié)合會(huì)影響在 SDS-PAGE 凝膠中的電泳遷移率。預(yù)染色蛋白的表觀分子量如凝膠圖所示。
保存:保存在 62.5 mM Tris-H3PO4 (在 25oC 下 pH 為 7.5)、1 mM EDTA、2% SDS、10 mM DTT、1 mM NaN3 和 33% 甘油中。在 -20°C 下可保存長(zhǎng)達(dá) 1 年。
重要提示:切勿煮沸蛋白標(biāo)記物
1. 在室溫下解凍蛋白梯。
2. 輕輕渦旋溶液,以確?;旌衔锘旌暇鶆颉?/span>
3. 按照下述規(guī)定,每個(gè)泳道上樣適量的蛋白標(biāo)記物:
-微凝膠:
0.75-1.0 mm 厚:上樣 10 μl
1.5 mm 厚:上樣 20 μl
-大凝膠:
0.75-1.0 mm 厚:上樣 20 μl
1.5 mm 厚:上樣 40 μl
4. 未使用的蛋白梯可放回,并在 -20oC 下長(zhǎng)期保存。
表觀分子量說明:
這些蛋白標(biāo)記物的相對(duì)量可能取決于所使用的凝膠類型,并且所顯示的大小可能與預(yù)期有所不同。帶電荷的染料分子結(jié)合蛋白標(biāo)記物會(huì)改變蛋白的總電荷,并有可能改變其在 SDS 聚丙烯酰胺凝膠中的遷移率。這種影響程度可能會(huì)隨著分析中所使用的凝膠類型(如 Tris-甘氨酸、Tris-三甲基甘氨酸)性質(zhì)變化而發(fā)生改變。為此,這里所說的標(biāo)記物蛋白大小為表觀分子量。為了獲得最佳結(jié)果,我們建議在 Tris-甘氨酸 SDS 凝膠上使用這些預(yù)染色的蛋白標(biāo)記物。
儲(chǔ)存于 -20°C 的溫度下。