新品 | NEST細胞培養(yǎng)類試劑上市！打造優(yōu)質細胞生長環(huán)境！
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作者:百菱生物
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發(fā)布時間: 532天前
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細胞培養(yǎng)是生物實驗里的入門實驗也是普遍要做的實驗，是后續(xù)操作的基礎性實驗，諸如篩選藥物、轉染、提取蛋白（RNA）等的進展。
但基礎并不代表容易，影響細胞狀態(tài)的因素有很多，包括初始細胞的狀態(tài)、培養(yǎng)基、血清、孵箱溫度、CO2濃度、培養(yǎng)器皿等，每一個因素的都至關重要，一不小心就前功盡棄。
此文章轉載自： 無錫耐思NEST
細胞培養(yǎng)是生物實驗里的入門實驗也是普遍要做的實驗，是后續(xù)操作的基礎性實驗，諸如篩選藥物、轉染、提取蛋白（RNA）等的進展。
但基礎并不代表容易，影響細胞狀態(tài)的因素有很多，包括初始細胞的狀態(tài)、培養(yǎng)基、血清、孵箱溫度、CO2濃度、培養(yǎng)器皿等，每一個因素的都至關重要，一不小心就前功盡棄。
NEST 為您帶來更全面的細胞培養(yǎng)解決方案，在原有的高品質細胞培養(yǎng)耗材產(chǎn)品線的基礎上，全面上線針對于培養(yǎng)基（DMEM高糖培養(yǎng)基、RPMI1640培養(yǎng)基、DMEM/F-12培養(yǎng)基、α-MEM 培養(yǎng)基、McCoy's 5A培養(yǎng)基、Leibovitz's L-15培養(yǎng)基）、活力檢測（細胞凋亡檢測試劑盒、細胞增殖檢測試劑盒）、細胞處理（抗生素/支原體清除劑、細胞消化解離試劑、細胞凍存試劑、平衡鹽溶液）三大方向所使用的試劑類產(chǎn)品，為高等院校、研究機構、醫(yī)院、CRO 及 CDMO 企業(yè)提供更全面的服務。
NEST細胞培養(yǎng)基人工模擬動物細胞的體內(nèi)生長環(huán)境，維持體外細胞存活和增殖的營養(yǎng)物質基礎，其主要功能是為細胞提供適宜的pH和滲透壓，以及細胞本身不能合成的各種營養(yǎng)物質。
1. 根據(jù)細胞株的特點、實驗的需要確定細胞培養(yǎng)基種類
細胞培養(yǎng)基有很多種，其中 DMEM、 RPMI 1640、 MEM 、 DMEM/F12 都是應用最廣泛的培養(yǎng)基。其他如：M199 、 IMDM 、 L15培養(yǎng)基等也用于某些細胞的培養(yǎng)。
2. 根據(jù)實驗需求選擇培養(yǎng)基的配方分型
● D-葡萄糖(D-Glucose)
作用：細胞生長所需的主要能量來源
高糖型DMEM中的葡萄糖濃度為4.5g/L，普遍應用于生長快、粘附性低的細胞、雜交瘤的骨髓瘤細胞、克隆細胞、DNA轉染的轉化細胞、原代病毒宿主細胞、單一細胞的培養(yǎng)以及疫苗的生產(chǎn)，例如利用CHO細胞表達EPO和生產(chǎn)乙肝疫苗。
● L-谷氨酰胺(L-glutamine)
作用：L-谷氨酰胺是一種氨基酸,細胞的重要能量來源,參與蛋白質的合成,也為合成核酸提供碳源。
存在的問題：
? L-谷氨酰胺不穩(wěn)定,在中性的水溶液中會自發(fā)降解。
? 降解產(chǎn)物氨對細胞有毒性。
解決方案：
對氨敏感的細胞（如干細胞和原代細胞等）或培養(yǎng)環(huán)境（高密度反應器,無補料的長期培養(yǎng)）不推薦含L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基，可使用前自行添加L-谷氨酰胺或選擇穩(wěn)定的L-丙氨酰-L-谷氨酰胺作為谷氨酰胺替代物。
●丙酮酸鈉(Sodium pyruvate)
作用：非必需組分，是一種能量來源。丙酮酸鈉在葡萄糖不足時可以作為細胞培養(yǎng)中的替代碳源，保證細胞更好地生長。
● HEPES
作用：pH緩沖劑。是一種氫離子緩沖劑,其作用不依賴于二氧化碳。
在一定范圍內(nèi)對細胞無毒性作用，能較長時間控制恒定的pH范圍，保證細胞良好生長。
部分細胞對酸堿度的變化非常敏感,建議使用含有HEPES的培養(yǎng)基。
●酚紅(Phenol red)
作用：pH值指示劑。pH值低時培養(yǎng)基呈黃色，pH值高時培養(yǎng)基呈紫色，pH值7.2-7.4時為紅色，該區(qū)間最適合細胞培養(yǎng)。
? 在一些無血清培養(yǎng)基的配方中酚紅會干擾鈉-鉀平衡培養(yǎng)，干細胞或細胞克隆時傾向于不加酚紅。
? 酚紅可以模擬固醇類激素的作用（特別是雌激素），在培養(yǎng)激素敏感的細胞（如乳腺組織）時，建議使用不含酚紅的培養(yǎng)基。
? 酚紅的顏色會對流式細胞分析產(chǎn)生一定的干擾，不建議使用含酚紅的培養(yǎng)基制備細胞樣品。
●碳酸氫鈉(Sodium bicarbonate)
作用：pH緩沖劑。pH7.2-7.4為細胞生長的最佳pH條件,多數(shù)培養(yǎng)基利用碳酸氫鈉進行緩沖。
碳酸氫鈉的緩沖需要二氧化碳。高碳酸氫鈉(1.5-3.7g/L)需要5-10%二氧化碳;低碳酸氫鈉(0.35g/L)不需要二氧化碳培養(yǎng)箱。
干粉培養(yǎng)基需要在配制時單獨添加碳酸氫鈉。
NEST? 培養(yǎng)基在培養(yǎng)細胞的細胞數(shù)和存活率方面均與進口品牌相媲美，且顯微鏡下細胞形態(tài)良好，長期培養(yǎng)細胞效果穩(wěn)定，可以完美取代進口培養(yǎng)基。
